Микоплазмы и уреаплазмы

До настоящего времени не сформулирован четкий ответ на вопросы о роли генитальных микоплазм в патологии урогенитального тракта, тактике ведения пациентов при обнаружении данных микроорганизмов, не доказана патогенность большинства видов микоплазм. Результаты лабораторных исследований зачастую служат единственным основанием для решения вопроса об этиологической значимости микоплазм в развитии урогенитальных заболеваний и необходимости лечения антибиотиками. При этом в нашей стране преимущественно используется диагностика с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), а на основании только этих результатов нельзя предпринимать какие-либо активные терапевтические действия, так как обнаружение ДНК микоплазм в урогенитальной системе не предполагает всегда обязательного назначения лечения.

Общая микробиология

Микоплазмы – группа внутриклеточных микроорганизмов - грамотрицательных бактерий размером 115 - 200 нм. Отличительными чертами микоплазм являются:
•    малые размеры жизнеспособных частиц, близкие к размерам крупных вирусов
•    отсутствие ригидной клеточной стенки
•    способность расти на бесклеточных питательных средах
•    полиморфизм клеток (кроме обычных овоидных клеток имеются нитевидные, звездчатые, почкующиеся формы)
•  на плотных средах колонии микоплазм имеют вид "яичницы глазуньи" (вросший в среду центр и ажурная периферия), в организме прикрепляются к мембране клетки (мембранные паразиты)
•    рост микоплазм ингибируют тетрациклины, макролиды; к бетта-лактамным антибиотикам, ингибирующим синтез клеточной стенки, микоплазмы природны резистентны
Известно, что различные органы человека могут быть колонизированы 16 видами микоплазм, 6 из которых обладают тропностью к органам урогенитальной системы:
•    Mycoplasma hominis
•    Ureaplasma urealyticum
•    Mycoplasma primatum
•    Mycoplasma genitalium
•    Mycoplasma spermatophilum
•    Mycoplasma penetrans
Наибольший практический интерес вызывают следующие 3 вида микоплазм:
•    Mycoplasma genitalium
•    Mycoplasma hominis
•    Ureaplasma urealyticum
Различают орофарингеальные и генитальные виды микоплазм. К патогенным для человека микоплазмам относят только 2 вида: Mycoplasma pneumoniae и Mycoplasma genitalium. Для других видов микоплазм патогенность строго не доказана.   

Mycoplasma genitalium

Данный вид микоплазм описан сравнительно недавно - в 1981 г. Детальное изучение биологических свойств микроорганизма затруднено в результате сложности его культивирования на питательных средах. Известно, что целый ряд признаков Mycoplasma genitalium является идентичным у другого патогенного для человека вида микоплазм - Mycoplasma pneumoniae. Среди этих свойств наряду с высокой требовательностью к питательным средам и медленным ростом, исследователи отмечают способность обоих видов микоплазм прикрепляться к стеклу, погруженному в питательную среду. Для идентификации Mycoplasma genitаlium используют молекулярно-биологические методы и наиболее часто - ПЦР. Имеются сведения о таких урогенитальных заболеваниях, обусловленных Mycoplasma genitаlium, как уретрит у мужчин и цервицит у женщин.
Mycoplasma genitalium обнаружены у 23-25% больных с негонококковым уретритом и лишь 6% здоровых мужчин, что свидетельствует об этиологическом значении данного микроорганизма в развитии уретрита. Подтверждением этих представлений является эффективность лечения доксициклином больных уретритом при наличии Mycoplasma genitalium. Считается, что только Mуcoplasma genitalium является абсолютным патогеном и вызывает патологические состояния, приводящие к нарушению репродуктивной функции как у женщин, так и у мужчин.

Mycoplasma hominis

Данный вид микоплазм известен с 1937 г., когда микроорганизм был выделен из абсцесса большой вестибулярной железы. Обычно Mycoplasma hominis определяется в вагинальном экссудате 50-60% практически здоровых женщин в низком количественном содержании.
Mycoplasma hominis рассматривалась как возможный этиологический агент негонококкового уретрита на протяжении последних 40 лет, однако проведенные масштабные исследования показали, что частота колонизации уретры данным микроорганизмом больных уретритом и здоровых лиц со сходным сексуальным анамнезом не имеет достоверных различий, что не позволило считать доказанной клиническое значение Mycoplasma hominis в развитии негонококкового уретрита.   
При бактериальном вагинозе частота и количественное содержание Mycoplasma hominis увеличивается. При некоторых осложнениях послеродового периода Mycoplasma hominis выделены из эндометрия и маточных труб. На начальном этапе изучения роли Mycoplasma. hominis была установлена ассоциация между обнаружением микроорганизма и неблагоприятным течением беременности при преждевременных родах, самопроизвольных выкидышах, некоторых заболеваниях новорожденных детей.

Ureaplasma urealyticum

Уреаплазмы описаны в 1954 г. при выделении этих микроорганизмов у чернокожих мужчин с негонококковым уретритом и без такового. В 1967 г. эти микроорганизмы обнаружены при репродуктивной патологии. Первоначально Ureaplasma urealyticum назывались T-микоплазмами (Shepard, 1974). В 1982 г. Robertson описал 14 серотипов Ureaplasma urealyticum, в 1990 году они были разделены на 2 геномные группы.
В 2002 г. Ureaplasma urealyticum биовар Parvo был выделен в отдельный вид Ureaplasma parvum, а биовар T 960 - в Ureaplasma urealyticum. Такое разделение видов уреаплазм основано на анализе генов и в будущем внесет ясность в разделение на патогенные и непатогенные виды возбудителя.
Так, известно, что инвазивные штаммы в 79,4% наблюдений относят к Ureaplasma parvum и чаще они выделяются из околоплодных вод женщин с неблагоприятным исходом беременности. Вид Ureaplasma parvum содержит 3 подвида, но связь отдельных подвидов с патогенными свойствами и инвазивностью не доказана.
При воспалительных заболеваниях органов малого таза Ureaplasma urealyticum выделяют чаще. Ureaplasma urealyticum признается возбудителем негонококкового уретрита у мужчин, что было доказано в экспериментальных исследованиях на волонтерах: развитие воспалительного процесса в уретре и появлением М-антител к Ureaplasma urealyticum.
Признается возможной роль Ureaplasma urealyticum в снижении фертильности у мужчин, поскольку при наличии возбудителя изменяется морфология сперматозоидов и теряется подвижность у значительной их части, а этиотропное лечение приводит к элиминации Ureaplasma urealyticum, нормализации морфологии и подвижности сперматозоидов и иногда - к восстановлению фертильности.
Многочисленные публикации не дали безупречных доказательств причастности этих микроорганизмов к перечисленным патологическим состояниям, и данный вопрос нуждается в дополнительном изучении. Поскольку Ureaplasma urealyticum также выделяются из уретры здоровых мужчин, точная пропорция больных с уретритом, ассоциированным с Ureaplasma urealyticum, неизвестна.   

Эпидемиология и клиника

Генитальные микоплазмы довольно часто выявляются среди разных групп населения. По материалам литературы, у 40% больных воспалительными заболеваниями мочеполовых органов выявляются микоплазмы. Частота колонизации Mуcoplasma hominis, по данным разных авторов, варьирует от 10 до 50%, а Ureaplasma urealyticum - от 11 до 80%.
В целом частота выявления Mуcohlasma hominis и Ureaplasma urealyticum прямо пропорциональна сексуальной активности, при этом Ureaplasma urealyticum обнаруживаются у женщин в 2-3 раза чаще, чем у мужчин.
Широкое распространение микоплазм среди здоровых женщин разного возраста позволило большинству исследователей рассматривать их в качестве комменсалов в составе нормального вагинального микробиоценоза, способных при определенных условиях к реализации патогенных свойств. Подтверждением этого мнения являются работы, свидетельствующие о том, что патогенность Gardnarella vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и анаэробных бактерий связана с массивностью колонизации микробными агентами очага инфекции.
При бактериальном вагинозе  частота обнаружения Ureaplasma urealyticum достигает 46%. Согласно данным A. Naessen, (1993 г.) Ureaplasma urealyticum гораздо чаще обнаруживается у больных с такими инфекциями, как герпес и генитальный кандидоз. Выявлена связь между гонококковой инфекцией и инфицированностью генитальными микоплазмами, которые обнаруживаются на поверхности колонии гонококков.
При этом Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum обнаруживаются в уретре, влагалище, прямой кишке у 20-75% практически здоровых людей, а многочисленные клинико-микробиологические и морфологические исследования до настоящего времени не смогли дать однозначного ответа о роли микоплазм в акушерско-гинекологической и неонатальной инфекционной патологии.   
Клинические синдромы, ассоциированные с микоплазмами, у мужчин
Чаще всего у мужчин негонококковый уретрит вызывается Chlamydia trachomatis (23-55%, в среднем 40%), Ureaplasma urealyticum (20-40%, в среднем 30%; по другим данным, 10-20%), Mycoplasma genitalium (12-25%), Trichomonas vaginalis (2-5%), (5-11%).
Основным заболеванием у мужчин, вызванным Ureaplasma urealyticum, является уретрит. Роль перечисленных микроорганизмов в развитии простатита считается недоказанной. В этиологии этих заболеваний определенную роль играет Mycoplasma genitalium. Современные методы выявления уреаплазм в моче, сперме у бесплодных мужчин в сопоставлении с морфологией сперматозоидов показали, что при большой концентрации уреаплазм деформируются сперматозоиды, при этом уреаплазмы прикрепляются к головке сперматозоида в средней его части, что может снижать их подвижность и фертильность.
Клинические синдромы, ассоциированные с микоплазмами у женщин
Широкое распространение микоплазм среди клинически здоровых женщин разного возраста позволило большинству исследователей рассматривать их в качестве условно-патогенных микроорганизмов (кроме Mycoplasma genitalium), способных при определенных условиях инициировать развитие патологических процессов.
Самым распространенным заболеванием, при котором почти всегда присутствуют Mycoplasma hominis (и нередко Ureaplasma urealyticum), является бактериальный вагиноз. При этом заболевании, кроме генитальных микоплазм, в клиническом материале влагалища обнаруживаются многие другие облигатные и факультативные анаэробные микроорганизмы: гарднереллы, превотеллы, анаэробные вибрионы, являющиеся симбионталы, анаэробные вибрионы, являющиеся симбионтами микоплазм. При гонорее, трихомонозе, хламидиозе часто также находят оба вида генитальных микоплазм.
Некоторые исследователи указывают на связь воспалительныз заболеваний органов малого таза с Mycoplasma hominis, что подтверждается не только выделением этого вида микоплазм в виде единственного микроорганизма, но также динамикой нарастания титра антител к нему в крови и повышением уровня С-реактивного белка. При воспалительных процессах в урогенитальном тракте, обусловленных различными микроорганизмами, нередко выявляются Ureaplasma urealyticum. При гонорее, трихомонозе, хламидиозе оба вида генитальных микоплазм находят в ассоциации с анаэробными микроорганизмами.
Однако еще раз следует подчеркнуть, что и Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum могут входить в состав вагинального микробиоценоза здоровых женщин.   
Течение беременности и родов на фоне инфекций, ассоциированных с генитальными микоплазмами.
Генитальные микоплазмы способны вызвать послеабортные и послеродовые осложнения, иногда довольно тяжелые, с повышением температуры тела, повышением титра специфических антител и С-реактивного белка. Восходящая инфекция характерна для преждевременных родов, при этом генитальные микоплазмы проникают в околоплодные воды и при целом околоплодном пузыре. В этих случаях возникают воспалительные очаги в плодных оболочках и эндометрии, обусловленные Ureaplasma urealyticum. Эти данные лежат в основе современного представления о роли Ureaplasma urealyticum в происхождении самопроизвольных абортов и преждевременных родов. Частота амниотической инфекции тем выше, чем меньше срок беременности при преждевременных родах. Однако бессимптомную бактериурию и бактериальный вагиноз значительно чаще, чем наличие уреаплазм в половом тракте, расценивают как причину преждевременных родов. Восходящее инфицирование околоплодных вод и возникающий воспалительный процесс ассоциируются с продукцией интерлейкинов и индукцией преждевременных родов.
Инфекционная патологии у новорожденных детей, ассоциированная   с генитальными микоплазмами
Передача генитальных микоплазм от матери ребенку происходит как антенатально, так и в родах. Колонизация кожных покровов, слизистых оболочек полости рта, глотки, мочеполовых органов обычно не сопровождается выраженными клиническими проявлениями. Лишь у недоношенных детей уреаплазмы могут вызвать тяжелые заболевания легких, головного мозга, иногда со смертельным исходом. Уреаплазмы у таких детей обнаруживают в ликворе, жидкости из желудочков мозга, трахеальном аспирате. Один и тот же биовар уреаплазм обнаруживается при исследовании материалов, взятых из разных очагов. Чем выше количественное содержание уреаплазм в половых путях матери, тем чаще наблюдается колонизация новорожденных. К тому же степень колонизации строго коррелирует с неблагоприятным действием на мать, плод, новорожденного: наблюдается низкая масса тела ребенка, меньше гестационный возраст, чаще диагностируется хориоамнионит. При низком уровне колонизации влагалища генитальными микоплазмами не наблюдается неблагоприятного влияния на исход беременности.

Современные методы лабораторной диагностики инфекций, ассоциированных с микоплазмами

Показаниями к обследованию на Mycoplasma genitalium являются:
Воспалительные процессы в нижних отделах мочеполового тракта.
•    Наличие осложнений (воспалительных заболеваний органов малого таза, бесплодие и пр.), возможных при инфицировании

Mycoplasma genitalium

•    Обследование полового партнера пациента с выявленной Mycoplasma genitalium.
•    При смене полового партнера без использования барьерных методов защиты (презерватив).
•    Обследование женщин при планировании и во время беременности.
ПЦР-исследование Mycoplasma genitalium (соскобы и кровь).
Качественное определение ДНК Mycoplasma genitalium методом ПЦР. Определяемый фрагмент - участки последовательности гена P69 Mycoplasma genitalium. Специфичность обнаружения - 99%; чувствительность анализа - не менее 200 молекул ДНК микоплазм в 5 мкл прошедшей обработку пробы.
Показания к назначению:
•    Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
•    Стертая картина воспаления мочеполовой системы.
•    Мужской и женский фактор бесплодия.
•    Внематочная беременность.
•    Беременность.
•    Подозрение на септические состояния, в том числе внутриутробный сепсис.
•    Наличие временной связи между процессом воспаления мочеполовой системы и поражением суставов, кожи и слизистых.
•  Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов).
•  Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного и латентного течения инфекции).
•    Ослабление иммунитета.
Интерпретация результатов - качественный тест.
«Обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для Mycoplasma genitalium.
«Не обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала не найдены фрагменты ДНК, специфичные для Mycoplasma genitalium.

Показаниями к обследованию на другие микоплазмы (Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis) являются:
•  Наличие клинико-лабораторных признаков воспалительного процесса органов урогенитального тракта при отсутствии патогенных микроорганизмов
•    Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез (невынашивание беременности, бесплодие, перинатальные потери и др.)
•    Осложненное течение настоящей беременности, предполагающее возможное инфицирование плода.

Антитела класса IgA к Mycoplasma hominis

Антитела класса IgA к Mycoplasma hominis – это показатель активации специфического гуморального иммунного ответа и обеспечивают гуморальную защиту против этого микроорганизма на уровне слизистых оболочек. Синтезируются они, как и IgM, уже на первых стадиях гуморального иммунного ответа при внедрении в организм патогена, поступая в секреты слизистых и частично в кровь. Концентрация IgA в крови, большей частью, коррелирует с выраженностью патологического процесса на уровне слизистых.
Используется как вспомогательный метод в дополнение к микробиологическим, иммуноаналитическому, и ПЦР исследованиям для диагностики патологических состояний, ассоциируемых с Mycoplasma hominis (как например, негонококковые уретриты у мужчин, урогенитальные воспалительные заболевания неясной этиологии и бесплодие у женщин).
Интерпретация результатов – качественный тест.
•    Положительно - текущая или недавняя инфекция Mycoplasma hominis.
•    Отрицательно - отсутствие инфицирования, недетектируемый уровень IgA антител.
•    Сомнительно - результат близок к пороговому значению, повторить исследование через 7 - 10 дней.
ПЦР-исследование Mycoplasma hominis (соскобы и кровь).
Качественное определение ДНК микоплазмы (Mycoplasma hominis) методом ПЦР. Определяемый фрагмент - участки последовательности гена белка 16S. Специфичность обнаружения - 99%; чувствительность анализа - не менее 100 молекул ДНК микоплазм в 5 мкл прошедшей обработку пробы.

Показания к назначению:
•    Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
•    Стертая картина воспаления мочеполовой системы
•    Беременность.
•    Внематочная беременность.
•    Мужской и женский фактор бесплодия
•    Наличие временной связи между процессом воспаления мочеполовой системы и поражением суставов, кожи и слизистых.
•    Подозрение на септические состояния, в том числе внутриутробный сепсис
•  Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов).
•  Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного и латентного течения инфекции).
•    Ослабление иммунитета.
Интерпретация результатов – качественный тест.
«Обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Mycoplasma hominis; В анализируемом образце биологического материала в результате нарушения правил забора материала находится химическое соединение (мочевина), приводящее к регистрации ложноположительного результата.
«Не обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Mycoplasma hominis.
Посев на Mycoplasma hominis и чувствительность к антибиотикам.

Показания к назначению
•    Урогенитальные инфекции при подозрении на наличие микоплазм.
•    Контроль терапии (на 10 - 14 день после отмены препарата).
Интерпретация результатов:
В норме результат отрицательный. При бессимптомном носительстве может определяться низкий титр (< 10х4 кое/тампон/мл).

Антитела класса IgA к Ureaplasma urealyticum

Антитела класса IgA к Ureaplasma urealyticum - маркер текущей или недавней инфекции Ureaplasma urealyticum.
После первого описания Ureaplasma urealyticum, было выделено 14 серотипов этого вида микроорганизмов. В дальнейшем, основываясь на характеристиках генома, их разделили на 2 биовара - биовар 1 (parvo biovar) объединяющий серотипы 1, 3, 6, и 14; и биовар 2 (T960-biovar), объединяющий серотипы 2, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, и 13. Поскольку гомология ДНК в этих биоварах составляет менее 60%, в настоящее время их классифицируют как отдельные виды - Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum (T960). В клинической практике Ureaplasma parvum выявляется чаще, но даже у одного человека могут быть выявлены оба вида уреаплазм одновременно.
Антитела класса IgА к Ureaplasma urealyticum появляются рано в ходе иммунного ответа при первичном инфицировании, а также реинфицировании или обострении инфекции. Это фактор гуморального иммунитета на уровне слизистых оболочек, важный фактор защиты против данного микроорганизма. Антитела класса IgА к Ureaplasma urealyticum можно обнаружить у части людей без клинических проявлений инфекции. Для инвазивных и экстрагенитальных форм инфекции характерны повышенные титры специфических антител всех классов. В пользу текущей инфекции может свидетельствовать также выраженный рост титров специфических антител за 2 недельный период. Отрицательный результат не исключает инфекцию Ureaplasma urealyticum - антитела класса IgA не всегда появляются в крови, уровень IgA антител может быть недостаточным для обнаружения. Повторное тестирование не ранее чем через 1 неделю с выраженным ростом титров антител говорит в пользу текущей инфекции.

Показания к назначению:
•  При подозрении на инфекцию Ureaplasma urealyticum (в динамике, в парных сыворотках параллельно с определением IgG, а также микробиологическим или ПЦР-тестированием).
•    В комплексе с исследованиями, направленными на выявление других патогенов при негонококковых уретритах, воспалительных заболеваниях матки и придатков, сальпингитах, бесплодии и других патологических состояниях, ассоциируемых с Ureaplasma urealyticum.
Интерпретация результатов - метод полуколичественный, единицы измерения – титры.
•    Титр «менее 5» – отрицательный
•    Титр  «5» – сомнительный
•    Титр «10» – слабо положительный
•    Титр «более или равен 20» – сильно положительный
Положительный титр:
•    Текущая или имевшая место в прошлом инфекция Ureaplasma urealyticum (высокие титры и рост титров за 2 недели свидетельствуют в пользу текущей инфекции);
•    Часть популяции здоровых людей.
Отрицательный титр:
•    Отсутствие инфицирования;
•    Ранние сроки инфекции;
•    Отдаленные сроки после перенесенной инфекции;
•    Неопределяемый уровень антител.
Сомнительный титр:
Результат близок к пороговому значению, рекомендуется повторить в динамике через 7 - 10 дней.
Антитела класса IgG к Ureaplasma urealyticum
Антитела класса IgG к Ureaplasma urealyticum - маркер текущей или перенесенной в прошлом инфекции Ureaplasma urealyticum.
Антитела класса IgG к Ureaplasma urealyticum являются свидетельством иммунного ответа, возникшего в ходе текущей или имевшей место в прошлом экспозиции к Ureaplasma urealyticum. Это важный фактор иммунитета против данного микроорганизма, поскольку лица с гипогаммаглобулинемией проявляют очень высокую восприимчивость к инвазивной инфекции Ureaplasma. Антитела класса IgG к Ureaplasma urealyticum можно обнаружить у людей без клинических проявлений инфекции. Но для инвазивных и экстрагенитальных форм инфекции характерно повышение титров специфических антител. В пользу текущей инфекции может свидетельствовать также выраженный рост титров специфических антител в парных сыворотках, взятых с интервалом в 2 недели (3 - 4-кратный). Отрицательный результат не исключает инфекцию U. urealyticum - пациент может быть инфицирован, но еще не продуцировать достаточное для обнаружения количество антител. Повторное тестирование не ранее чем через 1 неделю с выраженным ростом титров антител говорит в пользу текущей инфекции. IgG (в отличие от IgM и IgA) способны проникать через плаценту из крови матери в кровь плода, поэтому в крови новорожденных первые месяцы после рождения могут циркулировать материнские IgG., присутствие которых в однократно взятой пробе крови само по себе не свидетельствует об инфицировании.

Показания к назначению:
•  При подозрении на инфекцию Ureaplasma urealyticum (в динамике, в парных сыворотках, параллельно с определением IgG, а также микробиологическим или ПЦР-тестированием).
•    В комплексе с исследованиями, направленными на выявление других патогенов при негонококковых уретритах, воспалительных заболеваниях матки и придатков, сальпингитах, бесплодии и других патологических состояниях, ассоциируемых с Ureaplasma urealyticum.
Интерпретация результатов - метод полуколичественный, единицы измерения – титры.
•    Титр «менее  5»  – отрицательный
•    Титр «5» – сомнительный
•    Титр «10» – слабо положительный
•    Титр «более или равен 40»  – сильно положительный

Положительный титр:
•    Текущая или имевшая место в прошлом инфекция Ureaplasma urealyticum (высокие титры и рост титров в парных сыворотках свидетельствуют в пользу текущей инфекции).
•    Здоровые люди без клинических проявлений инфекции.
Отрицательный титр:
•    Отсутствие инфицирования.
•    Ранние сроки инфекции.
•    Отдаленные сроки после перенесенной инфекции.

Сомнительный титр:
Результат близок к пороговому значению, рекомендуется повторить в динамике через 7-10 дней.
Посев на Ureaplasma Urealyticum и чувствительность к антибиотикам
Показания к назначению:
•    Урогенитальные инфекции при подозрении на микоплазменную инфекцию.
•    Контроль после лечения (на 10 - 14 день после отмены препарата).

Интерпретация результатов:
В норме результат отрицательный.
При бессимптомном носительстве может определяться низкий титр (< 10х4 кое/тампон/мл).
ПЦР-исследование Ureaplasma parvum/ Ureaplasma urealyticum, биовар Т-960  (соскобы и кровь).
Качественное определение методом ПЦР - выявление ДНК уреаплазм в клинических образцах и идентификация ее биоваров. Определяемый фрагмент - область последовательности гена белка 16S уреаплазмы, специфичность обнаружения - 99%, чувствительность анализа - не менее 100 молекул ДНК уреаплазмы в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.

Показания к назначению:
•    Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
•    Стертая картина воспаления
•    Мужской и женский фактор бесплодия.
•    Беременность.
•    Внематочная беременность.
•    Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов).
•    Наличие временной связи между процессом воспаления мочеполовой системы и поражением суставов, кожи и слизистых.
•    Подозрение на септические состояния, в том числе внутриутробный сепсис.
•    Ослабление иммунитета.
Интерпретация результатов
«Обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для

Ureaplasma parvum

«Не обнаружено» - в анализируемом образце биологического материала не найдены фрагменты ДНК, специфичные для Ureaplasma parvum.
ПЦР-исследование Ureaplasma spp (соскобы).
В настоящее время Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum считаются отдельными видами и в практической деятельности пользуются термином Ureaplasma species (spp.) объединяющим оба вида. Качественное выявление фрагмента ДНК Ureaplasma spp. методом ПЦР: специфичность обнаружения - 99%, чувствительность анализа - не менее 200 ДНК - копий в 5 мкл прошедшей обработку пробы.

Показания к назначению
•    Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
•    Стертая картина воспаления.
•  Планирование беременности (исследование рекомендуется проводить у обоих супругов, особенно при хронических заболеваниях половых органов и пиелонефрите).
•    Беременность, особенно, внематочная
•    Мужской и женский фактор бесплодия
•    Ослабление иммунитета
•  Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов)
•  Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного и латентного течения инфекции).

Лечение инфекций, ассоциированных с урогенитальными микоплазмами.
Показания к терапии Mycoplasma genitalium
•    Подтвержденная инфекция Mycoplasma genitalium любой локализации.
•    Наличие Mycoplasma genitalium у полового партнера.
•    При отсутствии возможности проведения тестов на Mycoplasma genitalium у больных с клиническими проявлениями воспалительных заболеваний нижних отделов мочеполового тракта.
Показания к терапии Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis.
Лечение следует назначать, если, кроме микоплазм, других возбудителей не выявлено, при:
•    наличии клинических и лабораторных признаков воспалительного процесса органов мочеполовой системы;
•   предстоящих оперативных или других инвазивных лечебно-диагностических манипуляциях в области мочеполовых органов;
•   отягощенном акушерско-гинекологическом анамнезе (невынашивание беременности, бесплодие, перинатальные потери и др.);
•   осложненном течении настоящей беременности, предполагающим возможное инфицирование плода.
•   Лечение следует назначать при наличии клинических проявлений воспалительного процесса и в том случае, если Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis выявляются в количестве более 104 КОЕ/мл в титрах при культуральном исследовании.

В связи с тем что большинство генитальных микоплазм является условно-патогенными микроорганизмами, решение о необходимости назначения терапии в каждом клиническом наблюдении принимает клиницист. При наличии клинических проявлений воспалительного процесса и доказанной этиологической значимости микоплазм назначают антибактериальные препараты: тетрациклины, макролиды, фторхинолоны.
Известно, что все микоплазмы резистентны к цефалоспоринам, пенициллинам, рифампицину, налидиксовой кислоте. В то же время у 10% штаммов Ureaplasma urealyticum может наблюдаться резистентность к тетрациклину. Таким больным показано лечение препаратами других фармакологических групп (макролидами и фторхинолонами). На основании исследований, проведенных в 2002-2005 гг. в Научно-исследовательском институте акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН (Санкт-Петербург) наилучшие результаты по чувствительности генитальных микоплазм имели джозамицин и препараты тетрациклинового ряда: доксициклин и тетрациклин. Макролиды, включая азитромицин, эритромицин и кларитромицин, обладали низкой активностью.   

Основные выводы

1. Mycoplasma genitalium - патогенный микроорганизм, способный вызывать уретрит у лиц обоего пола и цервицит у женщин. Другие микоплазмы (Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis) присутствуют на слизистых оболочках и в выделениях урогенитального тракта у 40-80% практически здоровых лиц репродуктивного возраста в количестве менее 104 КОЕ/мл.
2. Ureaplasma. urealyticum - условно-патогенный микроорганизм, реализация патогенных свойств которого происходит при определенных условиях, способный вызывать уретриты у мужчин и циститы у женщин. В ассоциации с другими патогенными и/или условно-патогенными микроорганизмами может принимать участие в развитии различных патологических состояний, в том числе бактериального вагиноза, вагинита, цервицита, воспалительных заболеваний органов малого таза, осложнений течения беременности, послеродовых и послеабортных осложнений.
3. Роль Ureaplasma parvum в этиопатогенезе воспалительных заболеваний органов урогенитальной системы в настоящее время не установлена.
4. Mуcoplasma hominis - условно-патогенный микроорганизм, реализация патогенных свойств которого происходит при определенных условиях.   
5. Диагностика микоплазм.
Для выявления Mуcoplasma genitalium следует использовать молекулярно-биологические методы – ПЦР.
Для других микоплазм используют методы, позволяющие произвести количественную оценку содержания микроорганизмов в исследуемом материале. К таким методам относят культуральные методы, преимущественно с использованием плотных питательных сред и определением КОЕ (количество колониеобразующих единиц), а также ПЦР в реальном времени. При использовании жидких питательных сред следует определять количество микоплазм. Для исследования используют материал, полученный из уретры, влагалища, цервикального канала, а также мочу, секрет предстательной железы и эякулят.
Определение чувствительности к антибиотикам следует проводить при неэффективности терапии и рецидивировании процесса. В виду низкой информативности серологических и иммунофлюоресцентных методов диагностики использовать их нецелесообразно.   
6. Показания к назначению антибактериальной терапии.
• Лечение инфицированных пациентов предупреждает передачу инфекции половым партнерам, плоду и новорожденному, что особенно важно при выявлении M уcoplasma genitalium.
•   Лечение должно быть эффективным (>95%) и обеспечивать высокую комплаентность.
• Больных при выявлении Mуcoplasma genitalium следует обследовать на наличие инфекций передающихся половым путем.
7. Ведение половых партнеров
Половые партнеры лиц, у которых выявлены Mуcoplasma genitalium, подлежат обследованию и лечению.
Половые партнеры лиц, у которых выявлены другие микоплазмы, подлежат обследованию при наличии у них клинической симптоматики воспалительного процесса мочеполовых органов и отягощенном акушерско-гинекологическом анамнезе у партнерши.
8. Антибактериальная терапия.
Наиболее активные антибиотики in vitro для элиминации всех видов генитальных микоплазм из макролидов - джозамицин, из тетрациклинов - доксициклин.
При выявлении Mуcoplasma genitalium наиболее эффективны азитромицин, джозамицин, доксициклин.
9. Критерии излеченности
Контроль излеченности проводится у пациентов при выявлении M уcoplasma genitalium через 4 недели после окончания терапии с использованием ПЦР. Относительно Ureaplasma urealyticum и Mуcoplasma hominis контроль излеченности проводят через 4 недели после окончания лечения с помощью культурального метода исследования с определением количества микроорганизмов в выделенном материале, и в случае выявления их в диагностическом титре - определение чувствительности к антибиотикам.